北京细基百蕾生物科技有限公司

人气指数:0 页面更新时间:2022-04-16 09:18
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北京细基百蕾生物科技有限公司(CellgenBiolabs)是2007年创建的一个集生化试剂生产、研发与销售为一体的生物公司,本公司本着“高质量,优服务”的宗旨,自主研发了pSSB类载体产品,此载体用于构建可诱导、高水平表达的基因或基因片段,表达的融合蛋白的N端或C端带有SSB标签。融合蛋白进一步通过ssDNA-cellulose进行亲和层析纯化,从而达到高效纯化蛋白的目的。为蛋白纯化提供了一种新的亲和纯化体系,进一步拓宽了蛋白质纯化领域。

DNA单链结合蛋白(SSB, single-stranded DNA binding protein)由696bp核苷酸编码,分子量为25.6kDa。它与单链DNA有很强的亲和性,且与单链DNA协同结合,即一个SSB蛋白结合到单链DNA上,可以促进其它SSB蛋白与相邻单链DNA结合。利用这一特性,将SSB构建到不同宿主的表达载体中,可以实现在不同宿主中表达带有SSB标签的融合蛋白,从而与偶联在介质中的单链DNA高效、特异性结合,这种结合是可逆的,能够在温和、非变性的条件下通过改变洗脱液的pH值或盐浓度对融合蛋白进行洗脱,达到纯化的目的。

构建在一系列pSSB载体中的SSB蛋白来源于T7噬菌体,天然状态下为同源二聚体,结合在单链上,使DNA受到保护,不被酶水解,也不回复成双链,且此蛋白与单链DNA的亲和性高且无序列特异性。SSB标签可根据需要由位点特异的蛋白酶切除,pSSB系列质粒上多克隆位点上游包含有肠激酶(enterokinase)、凝血酶、TEV等识别序列。带有标签的蛋白可以通过免疫学方法进行检测,同时根据实验需要决定是否切除标签。

SSB亲和层析介质(ssDNA-cellulose)是专门设计用于纯化SSB融合蛋白及与SSB有亲和作用的蛋白质分离介质,通过盐离子梯度洗脱可得到高纯度的SSB融合蛋白,纯化条件温和,不引入其他物质,能够保证蛋白的活性。

公司坚持低成本、高质量、低价格、优质的服务态度的路线,为客户创造价值,为精英人才提供实现自我的舞台,通过吸引人才和发展激励人才,实现员工个人和公司的双赢,同时帮助研究者更快更好地进行生命科学实验,推动生物学的发展。欢迎广大用户垂询。

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